Транспортные сайты: ATI.SU – биржа грузоперевозок. Грузы, транспорт, тендеры.

Содержание

Новости сферы грузоперевозок, транспорта, логистики, экспедиции

Зарегистрируйтесь и получите бесплатный доступ к функционалу до конца февраля 2023-го года

Таможенный постПункт пропускаГраницаАзербайджанРоссияДагестанМАПП «Тагиркент-Казмаляр»МАПП «Яраг-Казмаляр»Транспортный коридор«Север-Юг»Строительство дорогГраницаКитайАмурская областьЯкутияМост «Джалинда-Мохэ»Транспортный коридорПункт пропускаГраницаКитайРоссияГраницаРоссияАстраханская областьКазахстанПункт пропуска«Караузек»Транспортный коридор«Север-Юг»ПольшаГрузоперевозкиРоссияБеларусьПроверкиПлатные дорогиТранспондерОбход ХабаровскаХабаровскХабаровский крайТарифыВесенние ограниченияВесенние ограничения 2023ГрузовикиВъезд в городОренбургОренбургская областьТурцияРоссияСанкцииОграниченияТранзитГрузоперевозкиВесенние ограниченияВесенние ограничения 2023ГрузовикиБеларусьКазахстанГраницаЗабайкальский крайКитайПункт пропускаДАПП «Староцурухайтуйский»ДАПП «Олочи»МАПП «Забайкальск»ГрузоперевозкиРежим перецепки/перегрузкиСанкцииЕСОграниченияГрузовикиРоссияКалининградская областьГрузоперевозкиАвтотранспортСанкцииЕСОграниченияВесенние ограниченияВесенние ограничения 2023ГрузовикиОренбургская областьГрузоперевозкиАвиацияМорское сообщениеСеверный морской путьКрайний СеверТранспортная доступностьВесенние ограниченияВесенние ограничения 2023ГрузовикиВъезд в городХабаровскХабаровский крайВесенние ограниченияВесенние ограничения 2023ГрузовикиРегионыБрянская областьКонтейнерный сервисМорское сообщениеПортСанкт-ПетербургЮжная АмерикаКарибский бассейнИндияЮАРСанкцииОсобая экономическая зонаТатарстанЛогистический центрИндустриальный паркГраницаРоссияГрузияСеверная ОсетияПункт пропускаВерхний ЛарсГрузовикиОграниченияТурцияПаромное сообщениеАзербайджанБеларусьИранГрузоперевозкиАвтотранспортРазрешенияПункт пропускаГраницаКитайЗабайкальский крайДАПП «Староцурухайтуйский»Весенние ограниченияВесенние ограничения 2023ГрузовикиПсковВъезд в городПсковская область

Новое на TRANS.

RU: Мы открыли доступ к каталогу компаний!

Trans.ruЛогистикаТарифыБиржа грузоперевозок

Транспортный коридорСеверный морской путьЧукоткаПортТерминалСтроительство дорогМоскваМосковская областьМосковский скоростной диаметрАвтомагистраль «Москва-Казань»ИмпортПараллельный импортАвтопромСанкцииОграниченияТурцияРоссияИмпортТранзитСанкцииОграниченияПараллельный импортВесенние ограниченияВесенние ограничения 2023ГрузовикиПриморский крайКонтейнерный сервисЖелезная дорогаРЖДКитайСамарская областьГраницаПункт пропускаЛенинградская областьФинляндияЭстонияМАПП «Брусничное»МАПП «Ивангород»МАПП «Светогорск»

С 22 февраля в России подорожает проезд по платным дорогам «Автодора»

Польским грузовикам разрешили въезжать в Беларусь только через белорусско-польский участок границы

Польша ставит ультиматум и обещает ограничить движение фур через последний работающий для грузовиков пункт пропуска на границе с Беларусью

Грузовики из Казахстана, Кыргызстана, Турции и других стран, не входящих в Евросоюз, не могут пересечь белорусско-польскую границу

Десятый санкционный пакет: по территории России запретили транзит товаров двойного назначения

Новая транспортная реальность.

Дорожные проекты 2023 г. / Сайт Сергея Собянина

13 февраля в 09:00

В 2023 г. планируем завершить несколько важнейших дорожных проектов – Московский скоростной диаметр, Южную рокаду, несколько развязок на МКАД.

Вместе с ранее построенными дорогами эти магистрали естественным образом сформируют Четвертое транспортное кольцо и тем самым создадут новую транспортную реальность для миллионов московских автомобилистов. В большинство районов средней части города можно будет проехать напрямую, кратчайшим путем, минуя МКАД, ТТК и центральную часть города.

Огромная работа, тысячи больших и малых проблем. Тем не менее, эти уникальные проекты сегодня вышли на финишную прямую.

Московский скоростной диаметр – магистраль длиной 68 км от Бусиновской развязки до Варшавского шоссе с ответвлением в сторону будущей федеральной трассы до Казани.

Основной участок трассы уже введен в эксплуатацию. До конца года планируем открыть движение по южному участку МСД от шоссе Энтузиастов до МКАД в районе Варшавского шоссе.

В общей сложности это порядка 30 км новых магистральных дорог, большая часть которых – сложнейшие эстакады, мосты и тоннели. Работы идут полным ходом и уже сегодня контуры будущей трассы ясно обозначились на карте Москвы.

Кроме того, в январе мы открыли участок МСД от Покровской улицы до Зенинского шоссе.

До конца года планируем завершить стыковку этой магистрали с казанской трассой на юго-востоке.

Построить участок от Лухмановской до Покровской улицы …

и мост через реку Пехорку.

Всего – с учетом дублеров, съездов, развязок – в составе Московского скоростного диаметра будет построено 219 км дорог и 141 искусственное сооружение: 103 эстакады, 24 путепровода, 9 мостов и 5 тоннелей. Вдвое больше, чем в свое время было построено в составе Третьего транспортного кольца.

Благодаря МСД в 2 раза сократится перепробег транспорта по направлению Юг – Северо-Запад и в 1,5 раза – Северо-Запад – Восток.

Скоростная трасса улучшит транспортную связь 48 районов Москвы с населением порядка 4,5 млн человек. В зависимости от расстояния и времени суток время в пути сократится от 10 до 50 минут (а в часы пик и вовсе до 85 минут).

* * *

Практически одновременно с МСД будет завершено и формирование Южной рокады.

К настоящему времени введено в эксплуатацию 32,5 км магистрали от Рублёвского шоссе до Пролетарского проспекта. До конца текущего года планируем сдать последние участки, в том числе:

От Каспийской улицы до 1-го Котляковского переулка.

и транспортную развязку на пересечении МКАД с улицами Верхние Поля и Капотня

* * *

В 2023 г. мы завершим еще одну важнейшую дорожную программу – реконструкцию развязок на МКАД.

Начиная с 2012 г. обновили 19 развязок. В общей сложности – с учетом боковых проездов и переходно-скоростных полос – было построено порядка 167 км дорог.

Осталось завершить реконструкцию развязки с Липецкой улицей – одной из самых крупных и проблемных на МКАДе. В результате будет обеспечен беспрепятственный выезд транспорта с Каширского шоссе и Южной рокады на федеральную трассу М-4 «Дон».

И развязки с Алтуфьевским шоссе, что серьезно увеличит пропускную способность северного участка МКАД.

* * *

На западе Москвы будет завершена реализация уникального проекта – Северного дублера Кутузовского проспекта

, первой магистрали Москвы, построенной частным инвестором в рамках концессионного соглашения.

Шестиполосная вылетная магистраль пройдёт от делового центра «Москва-Сити» и ТТК до транспортной развязки на пересечении МКАД с Молодогвардейской улицей и далее выйдет на Северный обход города Одинцово в Московской области.

Уникальной особенностью новой трассы является то, что около 50% магистрали составят сложные искусственные сооружения. В частности будут построены одна из самых протяженных эстакад в Москве – около 2 км от МКАД до станции Рабочий поселок, мост через Москву-реку, путепроводы через ж/д пути и многочисленные эстакады-съезды на прилегающие дороги.

Строительные работы вышли на финишную прямую.

* * *

Для повышения пропускной способности магистральных дорог и улучшения межрайонных транспортных связей мы системно занимаемся строительством и реконструкцией путепроводов через железнодорожные пути.

С 2011 г. ввели в эксплуатацию 22 путепровода, каждый из которых представляет сложнейшее и ответственное инженерное сооружение. Еще 19 путепроводов находятся в стадии проектирования и строительства.

В 2023 г. завершим реконструкцию Дмитровского путепровода недалеко от платформы Петровско-Разумовская, который за полвека эксплуатации пришел в предаварийное состояние. В результате будет ликвидировано еще одно узкое место на Дмитровском шоссе и созданы условия для открытия движения по МЦД-3 и строительства высокоскоростной ж/д магистрали Москва – Санкт-Петербург.

* * *

Продолжаем формирование транспортного каркаса Новой Москвы.

В этом году откроем дорогу «Варшавское шоссе – деревня Андреевское – деревня Яковлево»,

которая станет продолжением введенной в эксплуатацию в 2019 г. трассы «Калужское шоссе – деревня Яковлево».

Таким образом, будет создана еще одна связка между Калужским и Варшавским шоссе протяженностью 17 км. Жителям Троицка и прилегающих территорий станет удобнее добираться в Щербинку и до станций МЦД-2.

В рамках проекта будет построено три искусственных сооружения: путепровод через железнодорожные пути Курского направления, эстакада вдоль Варшавского шоссе и мост через реку Десну.

Куда приходит дорога, туда приходит жизнь. Московские транспортные проекты дают огромный толчок к развитию прилегающих территорий. Растет малый и средний бизнес, возникают новые рабочие места, начинается модернизация заброшенных промзон и прочих нерационально используемых территорий. Город становится ближе.

Награды за лучший транспортный веб-сайт

Ежегодно Ассоциация веб-маркетинга называет лучших транспортный веб-сайт в рамках ежегодного конкурса WebAward. С 1997 года WebAwards признана ведущей отраслью на основе программы Website Award в мире.

Это ваш шанс выделиться среди конкурентов и получить признание, которого вы заслуживаете, получая ценные независимые отзывы о ваши усилия по развитию.

Нажмите здесь, чтобы введите свой веб-сайт в Конкурс WebAward Ассоциации веб-маркетинга 2023 года.

Лучшие транспортные сайты выбираются судьями, которые рассматривают представленные веб-сайты, использующие следующие семь критериев:

2022 Лучший транспортный сайт
Flinders Port Holdings
Будет ли ваш сайт следующий?

Дизайн
Простота использования
Копирайтинг
Интерактивность

Использование технологии
Инновация
Содержание

Как участник вы получите:

Независимая оценка вашего транспорта Веб-сайт независимыми судьями-экспертами
Ценные отзывы, которые помогут сравнить ваши усилия с другие веб-сайты транспортной отрасли.

Если ваш сайт получит признание транспортной WebAward, вы также получить:

Красивая статуя или свидетельство о достижениях для демонстрации с гордостью
Повышение узнаваемости вашей компании
Отличная маркетинговая возможность для продвижения вашего сайта в СМИ
Ссылки на ваш сайт с сайта WebAward с высоким рейтингом, чтобы помочь SEO
Восхищение сверстников, друзей и коллег – может быть, даже поднимать!
Личное достижение для вашего резюме

Каждый год Конкурс WebAward Ассоциации интернет-маркетинга определяет лучший транспорт Веб-сайт. Лучшие веб-сайты выбираются путем оценки введенных веб-сайтов с использованием семь критериев — дизайн, простота использования, копирайтинг, интерактивность, использование технологии, инновации и содержание. Веб-сайты, не выбранные в качестве лучшего транспорта веб-сайт также имеют право на получение награды «Выдающийся веб-сайт» или стандарта Награда за превосходство.

Настройка транспорта Тенденции и создание Новости транспорта

Будьте в курсе всей Ассоциации веб-маркетинга Премиальные программы и Присоединиться к нашему списку рассылки. Вы также можете следить за нами на фейсбук, LinkedIn и Твиттер.

Участие в WebAwards может помочь вам быть в курсе транспортных тенденций, показав вам, как другие транспортные веб-сайты по сравнению со стандартами WebAward. Вы также можете сделать транспортные новости, если у вас есть Лучший транспортный сайт. письма с новостями о транспорте захотят рассказать о вашей победе обеспечивая вам дополнительную видимость в вашей отрасли.

Прием заявок на 2023 год открыт! Это ваша возможность получить признание, которого вы заслуживаете.

Войти легко. Просто создайте новый бесплатный Аккаунт номинатора или войдите в существующую учетную запись Nominator. Введите информацию о своем сайте и судьи делают все остальное.

Не ждите, войдите на свой сайт сегодня и получите признание ты заслуживаешь!

Нажмите здесь, чтобы введите свой веб-сайт в Конкурс WebAward Ассоциации веб-маркетинга 2023 года.

Вы может быть следующий Лучший транспортный веб-сайт, ожидающий признания!

Вот последние победители WebAward за лучший транспорт:

Год	Победитель	Название объекта
2022	Хьюз PR	Флиндерс Порт Холдингс
2021	Витал	Торговый флот
2020	об/мин	RPMmoves.com
2019	Интрепи Медицинский маркетинг	Веб-сайт Ride Gotcha
2018	DHL Посылка и один ботинок	Моя посылка DHL
2017	Интернет-маркетинг TopSpot	Веб-сайт Great Western Leasing & Sales
2016	Медиа-лаборатория и PeruRail	Веб-сайт PeruRail
2015	МТР Корпорейшн Лимитед	Веб-сайт ССО
2014	Интерактивное агентство RED	Треки Лайонела
2013	Фрейтополис	Freightopolis. com
2012	Ин10сити	Международный аэропорт Шарлотта Дуглас (CLT)
2011	FreightCenter.com	FreightCenter.com
2010	Органик, Инк.	Опыт Dodge Charger 2010 года
2009	Определение 6	Редизайн веб-сайта парковочной компании America Airports
2008	Разумный	Модернизация HondaJet, этап 3
2007	Команда Вундермана Детройт	Достичь большего
2006	Arnold Worldwide и IQ Interactive	Веб-сайт Freedom of the Seas
2005	еКурьер	ЭКурьер
2004	Онлайнфокус	Удостоверение личности FedEx
2003	ИС-решения	GetMeThere

*некоторые URL-адреса могут быть недействительны, особенно для пожилых победителей WebAward.

Будьте в курсе всего Интернета Премиальные программы Ассоциации маркетинга и Присоединиться к нашему списку рассылки.

Чтобы увидеть других победителей отрасли, нажмите на ссылку ниже:

Сопряженные механизмы синтеза и транспорта стеролов в местах контакта ER-эндоцитов

. 2021 4 октября; 220(10):e202010016.

doi: 10.1083/jcb.202010016. Epub 2021 20 июля.

Хавьер Энсинар Дель Дедо ¹ , Исабель Мария Фернандес-Гольбано ¹ , Лаура Пастор ¹ , Паула Мелер ¹ , Кристина Феррер-Орта ¹ , Елена Реболло ¹ , Мария Изабель Гели ¹

принадлежность

¹ Институт молекулярной биологии Барселоны, Испанский исследовательский совет, Барселона, Испания.

PMID: 34283201
PMCID: PMC8294947
DOI: 10. 1083/jcb.202010016

Бесплатная статья ЧВК

Хавьер Энсинар Дель Дедо и др. Джей Селл Биол. 2021 .

Бесплатная статья ЧВК

. 2021 4 октября; 220(10):e202010016.

doi: 10.1083/jcb.202010016. Epub 2021 20 июля.

Авторы

принадлежность

¹ Институт молекулярной биологии Барселоны, Испанский исследовательский совет, Барселона, Испания.

PMID: 34283201
PMCID: PMC8294947
DOI: 10.1083/jcb.202010016

Абстрактный

Стерины неравномерно распределены в клеточных мембранах. Как организованы их биосинтетические и транспортные механизмы для создания гетерогенности, в значительной степени неизвестно. Ранее мы показали, что дрожжевой переносчик стеролов Osh3 рекрутируется на эндоплазматический ретикулум (ER)-эндоцитарные контакты для облегчения полимеризации актина. Теперь мы находим, что подмножество ферментов биосинтеза стеролов также локализуется в этих контактах и взаимодействует с Osh3 и эндоцитарным аппаратом. Следя за динамикой стеролов, мы показываем, что Osh3 извлекает стеролы из этих субдоменов, которые мы называем ERSES (сайты выхода стеролов ER). Кроме того, мы показываем, что сопряжение механизмов синтеза и транспорта стеролов необходимо для эндоцитоза в материнских клетках, но не в дочерних, где загрузка плазматической мембраны доступными стеролами и эндоцитоз связаны с секрецией.

Цифры

Рисунок S1.

Асимметричное распределение маркировки GFP-D4H…

Рисунок S1.

Асимметричное распределение маркировки GFP-D4H в дрожжах. (А) Схема зонда GFP-D4H…
Рисунок S1.
Асимметричное распределение маркировки GFP-D4H в дрожжах. (A) Схема зонда GFP-D4H, распознающего стеролы. (B) Кимограммы покадровых фильмов флуоресценции участков коры Sla1-mCherry клеток WT, экспрессирующих или не экспрессирующих GFP-D4H. Изображения снимались каждые 1 с. График средней продолжительности жизни ± SEM кортикальных участков Sla1-mCherry с s Стьюдента t Тестовые значения P показаны ( n > 150). (C) Поздний путь биосинтеза эргостерола. Эрги, локализованные в ERSES, показаны синим цветом. Указаны шаги, ингибируемые TBF и FPM. (D–G) ДИК и эпифлуоресцентные микрофотографии указанных штаммов, экспрессирующих GFP-D4H, выращенных при 25°C или при сдвиге при 37°C в течение 1 ч (F). Стрелки указывают на везикулоподобные структуры. Графики в F и G представляют средние частоты ± SEM для клеток, демонстрирующих поляризованное окрашивание. n > 100 клеток в трех опытах.

Рисунок 1.

Асимметричное распределение GFP-D4H. (А)…

Рисунок 1.

Асимметричное распределение GFP-D4H. (A) Дифференциальный интерференционный контраст (ДИК) и флуоресценция в одной фокальной плоскости…
Рисунок 1.
Асимметричное распределение GFP-D4H. (A) Дифференциальный интерференционный контраст (DIC) и флуоресцентные микрофотографии (FM) в одной фокальной плоскости указанных штаммов, экспрессирующих GFP-D4H, при указанных температурах. Стрелки указывают на везикулоподобные структуры. Показана та же микрофотография с повышенной яркостью. Указаны средние ± SEM частоты окрашивания поляризованных PM. n > 100 клеток из трех экспериментов. (B и C) Объединенные FM пяти фокальных плоскостей 0,1 мкм клеток, экспрессирующих GFP-D4H и либо Sec61-mCherry (B), либо Abp1-mCherry (C). Показаны отдельные каналы и объединенные увеличенные кадры (B) или таймлапсы (C). Средние ± SEM частоты колокализации между корковыми пятнами GFP-D4H и ободками Sec61-mCherry (B) или пятнами Abp1-mCherry (C). n > 100 ободков или заплат из трех экспериментов. (D) Объединенная FM клетки, экспрессирующей Sec61-YFP, mCherry-D4H и Abp1-CFP. Показаны отдельные каналы и объединенные увеличенные кадры. (E) Электронные микрофотографии обода cER или ER-эндоцитарных MCS, иммуномеченых для HA-GFP-D4H. cER окрашен в красный цвет. Стрелки указывают на эндоцитарные инвагинации. (F) Анализ QEM, показывающий колокализацию мечения HA-GFP-D4H эндоцитарными белками и ободками ER. Указаны средние ± SEM для GRP указанных эндоцитарных белков или зонда GFP-D4H или относительного положения ER (ERRP). Подробную информацию см. на рис. S2 A. Красные звездочки, P <0,001; оранжевые звездочки, 0,001 ≤ P < 0,1; отсутствие звездочек, P > 0,1; т тест. n > 100 золотых частиц/инвагинаций для эндоцитарных белков и ободков ЭР и n > 40 для золотых частиц/инвагинаций Ош3/3 и GFP-D4H.

Рисунок S2.

Ош3 использует встречный транспорт PI4P для…

Рисунок S2.

Ош3 использует встречный транспорт PI4P для обеспечения экстракции стеролов из ERSES. (A) График, представляющий…
Рисунок S2.
Ош3 использует встречный транспорт PI4P для поддержания извлечения стеролов из ERSES. (A) График, представляющий расстояние золота HA-GFP-D4H до PM (GDPM) в зависимости от длины ассоциированной инвагинации (IL) для 40 эндоцитарных инвагинаций. GRP рассчитывается путем деления GDPM на IL. Красные линии указывают положение PM (GRP = 0) и положение кончика инвагинации (GRP = 1) по мере роста инвагинации. Иммуно-золото с GRP <0,5 определяется как находящееся в основании инвагинации, с 0,5 ≤ GRP <0,8 в шейке инвагинации и GRP ≥ 0,8 на кончике инвагинации. Диаграмма справа описывает параметры, определенные для каждой частицы золота, cER или инвагинации для изображенной инвагинации IL = 150 нм. (B) Объединенные эпифлуоресцентные микрофотографии клеток WT и клеток osh5Δ , экспрессирующих GFP-D4H и Sec61-mCherry. Представлены графики среднего ± SEM количества кортикальных пятен GFP-D4H, общего количества фокусов GFP-D4H и их RFI, нормализованных к WT в указанных штаммах, со значениями P теста Стьюдента t . Существенные различия показаны красным цветом. n > 45 клеток или пятен в трех экспериментах. (C) Кимограммы кортикальных участков GFP-D4H у WT или osh3 Δ клетки либо имитировали, либо обрабатывали указанными препаратами. Снимки делали каждые 5 с в течение 12 мин, а препараты добавляли через 2 мин после начала эксперимента (красная линия). (D) Динамика RFI кортикального участка GFP-D4H, нормализованная по времени 0, в клетках WT или osh3Δ , обработанных FPM. Препарат добавляли через 2 мин после начала эксперимента (красная пунктирная линия). Указывается значение P теста Стьюдента t в последний зарегистрированный момент времени ( n ≥ 10). (E) График средних значений ± SEM с помощью теста Стьюдента t P значений интенсивности кортикального пятна GFP-D4H для указанных штаммов, 1 ч после инкубации с TBF или с имитацией обработки. RFI нормализован к среднему показателю ложно обработанного образца. (F) График средних значений ± SEM с тестом Стьюдента t P значений интенсивности кортикального пятна GFP-D4H указанных штаммов до (0 мин) или после 1-часовой обработки (60 мин) OSW-1. RFI нормирован на среднее значение 0-минутной выборки. Существенные различия отмечены красным цветом. (G) Объединенные эпифлуоресцентные микрофотографии указанных штаммов, экспрессирующих GFP-D4H и Sec61-mCherry, до (0 мин) или после 1-часовой обработки OSW-1. На графике показано среднее значение ± стандартная ошибка среднего процента клеток с поляризованным окрашиванием GFP-D4H в указанных штаммах. (H) Объединенные эпифлуоресцентные микрофотографии штаммов WT или osh3Δ , несущих либо пустую плазмиду ( osh3Δ ), либо плазмиды, кодирующие указанные аллели Osh3 , экспрессирующие GFP-D4H и Sec61-mCherry. Показаны отдельные каналы и объединенные микрофотографии увеличенных областей, показывающие участки коры GFP-D4H, связанные с ободками cER. 9и графики средних значений ± SEM с тестом Стьюдента t P значений относительного PM/цитозольного (Cyt.) RFI для соответствующих зондов и указанных фоновых штаммов.

Рисунок 2.

Ош3 извлекает стеролы из коркового…

Рисунок 2.

Ош3 экстрагирует стеролы из коркового ERSES. (A) Объединенные ФМ указанных штаммов…
Фигура 2.
Ош3 извлекает стеролы из коркового ERSES. (A) Объединенные FM указанных штаммов, экспрессирующих GFP-D4H и Sec61-mCherry. Стрелки указывают на контакты. Показаны отдельные каналы и объединенные увеличенные области. Среднее ± SEM и t test P указаны значения относительной интенсивности флуоресценции (RFI) пластыря cGFP-D4H, нормализованные к WT, или их количество на клетку. Достоверные различия показаны красным цветом ( n > 210 точек и n > 100 клеток соответственно). (B) Электронные микрофотографии клеток WT или osh3Δ , экспрессирующих HA-GFP-D4H, иммунодекорированных по эпитопу HA. CER выделен красным цветом. Среднее значение ± SEM и t тестовых значений P диаметра cER и процента меченых ободков ER или инвагинаций у WT и 9Обозначены 0433 osh3Δ клеток. Подробную информацию см. на рис. S2 A. Достоверные различия показаны красным ( n > 300 ободков cER и n > 80 инвагинаций). (C) Динамика RFI кортикального участка GFP-D4H, нормализованная до времени 0, в клетках WT или osh3Δ , имитирующих лечение (синий) или лечение (красный) указанными препаратами. Препарат добавляли через 2 мин после начала эксперимента (красная линия). t тестовые значения P, показывающие значительные различия в последнем времени, записанном для WT, указаны ( n ≥ 10). (D) Объединенные ФМ клеток, экспрессирующих Sec61-CFP, mCherry-D4H и Osh3-YFP. Показаны отдельные каналы и объединенные таймлапсы. (E) Среднее ± SEM и t тест P значения кортикального GFP-D4H patch RFI, нормализованные к WT (p OSh3 ) в клетках osh3Δ , экспрессирующих пустую плазмиду ( osh3Δ ) или плазмиды, кодирующие указанные аллелей ОШ3 . Значимые различия отмечены красным ( n > 80 участков).

Рисунок 3.

Подмножество эргов накапливается…

Рисунок 3.

Подмножество эргов накапливает в ERSES. (A и B) Объединенные FM…
Рисунок 3.
Подмножество эргов накапливается в ERSES. (A и B) Объединенные FM клеток, экспрессирующих Erg6-mCherry и Sec61-GFP (A) или GFP-D4H (B). Показаны отдельные каналы и объединенные увеличенные области. Указаны средние ± SEM частоты колокализации коркового Erg6-mCherry с Sec61-GFP (A) или GFP-D4H (B). n > 75 ободков или накладок. (C) Конфокальные FMs клеток, экспрессирующих Sec61-YFP, Abp1-CFP и Erg6-mCherry. Показаны отдельные каналы и объединенные увеличенные таймлапсы. Стрелки указывают на контакты. Указаны средние ± SEM частоты колокализации Erg6-mCherry с Abp1-CFP. n > 100 из трех опытов. (D) Иммуноблоты агарозных преципитатов анти-GFP (IP [GFP]) из дрожжей, экспрессирующих белок A (ProtA), GFP и/или меченые HA белки (+) или немеченые (-), зондированные на указанные эпитопы . В качестве исходных данных загружали 10 мкг общего белка. (E и G) Диаграмма взаимодействий и двухгибридных анализов Ergs по сравнению с Myo5 (E) или Oshes (G). Синий указывает на взаимодействие. BICOID использовали в качестве отрицательного контроля. Th2, гомология хвоста 1; Sh4, гомология Src 3; CA, центральный и кислый; АНК – анкириновые повторы; PH, гомология плекстрина; N, N-концевой домен. (F) Сеть межбелковых взаимодействий. Фиолетовые линии обозначают взаимодействие (Encinar del Dedo et al., 2017; Mo and Bard, 2005). Красные линии описаны здесь. (H) Индивидуальные каналы и объединенные ФМ клеток, экспрессирующих Erg6-mCherry и Osh3-GFP. Показаны отдельные каналы и объединенные увеличенные вставки. Указаны средние ± SEM частоты колокализации коркового Erg6-mCherry с Osh3-GFP. n > 125 из трех опытов. (I) Среднее значение ± стандартная ошибка среднего и t test P значения RFI кортикального участка GFP-D4H, нормализованные к WT (p OSh3 ) в клетках osh3Δ , экспрессирующих пустую плазмиду или плазмиды, кодирующие аллели OSh3 . Значимые различия отмечены красным цветом ( n > 210). Показаны объединенные FM соответствующих ячеек, а также объединенные и отдельные каналы увеличенных областей. (J) Серийные разведения клеток erg6Δ , несущих пустую плазмиду (p) или плазмиды, кодирующие WT ERG6 или каталитически неактивный мутант ( erg6-D152L ), выращенных при указанных температурах. (K) GFP-D4H кортикальный участок RFI, нормализованный к WT (p ERG6 ) для клеток erg6Δ , несущих пустую плазмиду (p) или плазмиды, кодирующие ERG6 или erg6-D152L .

Рисунок S3.

Подмножество белков Erg…

Рисунок S3.

Подмножество белков Erg маркирует горячие точки эндоцитов. (A) Отдельные каналы и…
Рисунок S3.
Подгруппа белков Erg метит горячие точки эндоцитов. (A) Индивидуальные каналы и объединенные эпифлуоресцентные микрофотографии клеток, экспрессирующих указанные Ergs, помеченные mCherry (красный) и/или GFP (зеленый). (B) ДИК, отдельные каналы и объединенные ФМ клеток, экспрессирующих Erg6-mCherry, окрашенных BODIPY (0,5 мкг/мл). Стрелки указывают на корковые точки Erg6-mCherry без обнаруживаемого сигнала BODIPY. (C) Слияние FM клеток, экспрессирующих Erg27-GFP и Abp1-mCherry, и слияние временных интервалов указанных увеличенных областей, показывающих повторяющуюся сборку эндоцитарного актина (стрелки) в ERSES. (D и E) Иммуноблоты агарозных преципитатов анти-GFP (IP [GFP]) из дрожжей, экспрессирующих указанный белок A (ProtA), GFP или HA-меченые белки (+) или немеченые версии (-), зондированные на наличие HA (α-HA), белок A (PAP) или GFP (α-GFP). Во входы загружали 10 мкг общего белка. (F) Окрашивание Понсо красным (верхняя панель) и иммуноблоттинг (нижняя панель) глутатион-сефарозных пул-даунов GST или GST, слитых с Osh3 ORD, экспрессированных и очищенных из E. coli и инкубированных с дрожжевыми экстрактами экспрессирующий Erg6-GFP (+) или непомеченный Erg6 (-), зондированный на наличие GFP (α-GFP). (G) Эпифлуоресцентные микрофотографии указанных штаммов дрожжей, экспрессирующих GFP-D4H, обработанных в течение 2 ч ДМСО, TBF, FPM или OSW-1. (H) Средняя продолжительность жизни ± SEM и Стьюдента t test P значения продолжительности жизни кортикального участка Sla1-GFP в клетках osh3Δ , экспрессирующих указанные аллели OSh3 из центромерных плазмид. Достоверные различия отмечены красным ( n > 150). Показаны кимограммы покадровых фильмов флуоресценции для каждого экспериментального условия. Изображения снимались каждые 0,5 с.

Рисунок 4.

Асимметричная регуляция стеролзависимого эндоцитоза…

Рисунок 4.

Асимметричная регуляция стеролзависимого эндоцитоза у дрожжей. (A) Средний срок службы ± SEM…
Рисунок 4.
Асимметричная регуляция стеролзависимого эндоцитоза у дрожжей. (A) Средняя продолжительность жизни ± SEM и t тестовые значения P кортикальных участков Sla1-GFP в материнских и дочерних клетках клеток дикого типа, обработанных имитацией (ДМСО, +) или обработанных указанными лекарственными средствами, концентрациями и временем. Существенные различия показаны красным ( n > 150). Кимограммы покадровых флуоресцентных фильмов кортикальных участков Sla1-GFP для каждого показанного экспериментального состояния. Изображения снимались каждые 0,5 с. (B) Объединенные кимограммы участков коры (верхние панели) покадровых фильмов флуоресценции клеток, экспрессирующих Sla1-GFP и Abp1-mCherry, обработанных имитацией (ДМСО) или обработанных в течение 5 минут FPM или OSW-1. Изображения, сделанные каждые 0,5 с. Среднее ± SEM RFI коркового участка Abp1-mCherry в клетках, подвергнутых имитации (синий) или при указанных обработках (красный; n > 60).

Рисунок 5.

Требуется локальная передача стеролов…

Рисунок 5.

Локальный перенос стеролов необходим для эндоцитарного поглощения только в материнских клетках. (А–Г)…
Рисунок 5.
Локальный перенос стеролов необходим для эндоцитарного поглощения только в материнских клетках. (A–D) Средняя продолжительность жизни ± SEM и t тестовые значения P Sla1-GFP (A, B и D) или Sla2-GFP (C) корковых участков в материнских и дочерних клетках клеток WT или указанные мутанты, необработанные, ложно обработанные (ДМСО, +) или обработанные филипином (D). Значимые различия показаны красным ( n > 150). Показаны кимограммы покадровых флуоресцентных фильмов кортикальных участков Sla1-GFP для каждого экспериментального условия. Изображения снимались каждые 0,5 с.
См. это изображение и информацию об авторских правах в PMC
Похожие статьи
ORP-опосредованный контакт ER с эндоцитарными сайтами способствует полимеризации актина.
Encinar Del Dedo J, Idrissi FZ, Fernandez-Golbano IM, Garcia P, Rebollo E, Krzyzanowski MK, Grötsch H, Geli MI. Энсинар Дель Дедо Дж. и др. Ячейка Дев. 2017 4 декабря; 43(5):588-602.e6. doi: 10.1016/j.devcel.2017.10.031. Epub 2017 22 ноября. Ячейка Дев. 2017. PMID: 29173820
Гомологи оксистерол-связывающего белка опосредуют транспорт стерола из эндоплазматического ретикулума в митохондрии дрожжей.
Тиан С., Охта А., Хориучи Х., Фукуда Р. Тянь С. и др. Дж. Биол. Хим. 2018 13 апреля; 293(15):5636-5648. doi: 10.1074/jbc.RA117.000596. Epub 2018 27 февраля. Дж. Биол. Хим. 2018. PMID: 29487131 Бесплатная статья ЧВК.
Сайты контактов эндоплазматического ретикулума и плазматической мембраны интегрируют регуляцию стеринов и фосфолипидов.
Куон Э., Сере Ю.Ю., Чаухан Н., Йохансен Дж., Салливан Д.П., Диттман Дж.С., Райс В.Дж., Чан Р.Б., Ди Паоло Г., Бех К.Т., Менон А.К. Куон Э. и др. PLoS биол. 2018 21 мая; 16 (5): e2003864. doi: 10.1371/journal.pbio.2003864. Электронная коллекция 2018 май. PLoS биол. 2018. PMID: 29782498 Бесплатная статья ЧВК.
Транспорт стеролов в дрожжах и семейство гомологов оксистерол-связывающего белка (OSH).
Шульц Т.А., Принц В.А. Шульц Т. А. и соавт. Биохим Биофиз Акта. 2007 г., июнь; 1771 (6): 769-80. doi: 10.1016/j.bbalip.2007.03.003. Epub 2007 16 марта. Биохим Биофиз Акта. 2007. PMID: 17434796 Бесплатная статья ЧВК. Обзор.
Оборот эргостерола в дрожжах: взаимодействие между биосинтезом и транспортом.
Соколов С.С., Трушина Н.И., Северин Ф.Ф., Кнорре Д.А. Соколов С.С. и соавт. Биохимия (Москва). 2019 Апрель;84(4):346-357. doi: 10.1134/S000629791
23. Биохимия (Москва). 2019. PMID: 31228926 Обзор.
Посмотреть все похожие статьи
Цитируется
Интернализация липопротеинов низкой плотности, деградация и рециркуляция рецепторов вдоль мест контакта с мембраной.
Ислам М. М., Глущенко И., Пфистерер С.Г. Ислам М.М. и др. Front Cell Dev Biol. 2022 24 января; 10:826379. doi: 10.3389/fcell.2022.826379. Электронная коллекция 2022. Front Cell Dev Biol. 2022. PMID: 35141225 Бесплатная статья ЧВК. Обзор.
Рекомендации
Alfaro, G., Johansen J., Dighe S.A., Duamel G., Kozminski K.G., and Beh C.T.. 2011. Стерол-связывающий белок Kes1/Osh5p является регулятором поляризованного экзоцитоза. Трафик. 12: 1521–1536. 10.1111/ж.1600-0854.2011.01265.х — DOI — пабмед
Антонни Б. , Бигай Дж. и Месмин Б. 2018. Цикл оксистерол-связывающего белка: сжигание PI(4)P для транспорта холестерина. Анну. Преподобный Биохим. 87:809–837. 10.1146/аннурев-биохим-061516-044924 — DOI — пабмед
Бауманн Н.А., Салливан Д.П., Ово-Рекиля Х., Симонот С., Поттекат А., Клаассен З., Бех С.Т. и Менон А.К. 2005. Транспорт вновь синтезированного стерола к обогащенной стеролами плазматической мембране происходит посредством невезикулярного уравновешивания. . Биохимия. 44:5816–5826. 10.1021/bi048296z — DOI — пабмед
Бех, К. Т., Кул Л., Филлипс Дж. и Райн Дж. 2001. Перекрывающиеся функции гомологов оксистерол-связывающего белка дрожжей. Генетика. 157:1117–1140. 10.1093/генетика/157.3.1117 — DOI — ЧВК — пабмед
Бхаттачарья С., Эскивель Б.Д. и Уайт Т.С.. 2018. Сверхэкспрессия или делеция генов биосинтеза эргостерола изменяет время удвоения, реакцию на стрессовые агенты и чувствительность к лекарствам у Saccharomyces cerevisiae. МБио. 9:e01291-18.
No related posts.